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ARTICLES细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品名称:乳腺上皮细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X9990
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
TSH/FITC 荧光素标记小鼠抗人促甲状腺素单克隆抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
内脂素/内脏脂肪素 Visfatin-1/PBEF1 hu、 mo、 rat、MK 0.1ml
Phospho-MEK4 (Ser257 + Thr261) 英文名称: 磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗体 0.1ml
EXTL2 英文名称: 外生性骨疣样蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK gamma (Ser31) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体 规格 0.1ml
Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
MIP-1 Alpha 小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1αMulti-class antibodies规格: 48T
factor VIII(FVIII) human 第八因子相关抗原抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MRC2/CD280 巨噬细胞甘露糖受体2抗体 规格 0.1ml
TSST-1(Human toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit 人毒性休克综合征1 96T
SUPT16H 英文名称: 染色体特异性转录延伸因子抗体 0.2ml
Calcium Sensing Receptor 英文名称: 钙敏感受体1抗体 0.2ml
factor VIII(FVIII) human 第八因子相关抗原抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Goat Mouse IgM/PE PE标记的羊抗小鼠IgM 0.1ml
phospho-Filamin A (Ser1083) 英文名称: 磷酸化细丝蛋白A抗体 0.1ml
降钙素受体抗体 CT-R 0.1ml
p70 S6 Kinase/P70 Beta1/FITC 荧光素标记p70S6Kb抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-WNK1(Thr60) 磷酸化赖缺陷型蛋白激酶1抗体 规格 0.1ml
Rabbit horse IgM/Biotin 生物素化兔抗马IgMMulti-class antibodies规格: 0.3ml
乳腺上皮细胞*培养基RNasin(核糖核酸酶抑制剂)2500 U人生长调节致癌基因α/黑素瘤生长 因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒, G
MMLV(H点突变)2500 U人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒, HELIX-Ⅱ ELISA kit
Oligo(dT)18(500纳克/微升)100微升人麻疹病(MV)ELISA试剂盒,MV ELISA KIT
Hexamer(随机引物)(200纳克/微升)100微升人雌素诱导蛋白PS2 ELISA试剂盒,
SOCS20人脂氧素A人脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒,
RNA分析试剂专题人类白抗原G(HLA-G)ELISA试剂盒,
名称规格人核基质蛋白22(NMP-22)ELISA试剂盒,
甲醛变性RNA垂直电泳全套试剂盒10次小鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒,
北方杂交印迹消除试剂盒20次小鼠磷酸化外信号调节酶(pERK)ELISA试剂盒,
3’末端RNA同位素([γ32P]ATP)酶标记试剂盒10次小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA试剂盒,
RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂盒10次大鼠绒毛膜促性腺素β(β-CG)ELISA试剂盒,
同位素RNA北方杂交试剂盒5次大鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒,
非同位素HRP化学发光法RNA北方杂交试剂盒5次大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒,
非同位素AP化学发光法RNA北方杂交试剂盒5次大鼠烟酰腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒,
非同位素辛化学发光法RNA北方杂交试剂盒5次卵黄琼脂培养基基础 用于肉梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养(GB标准)
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