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ARTICLES细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品名称:小鼠T细胞;CTLL-2
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:YS-02X9838
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
YY1/FITC 荧光素标记核转录因子YY1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趋化因子受体1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
神经元突触前膜蛋白抗体 Amph 0.1ml
ZBTB3 英文名称: 锌指蛋白ZBTB3抗体 0.2ml
DRES17 英文名称: 癌相关蛋白DRES17抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-FADD(Ser194) 磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体 规格 0.1ml
CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趋化因子受体1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
ALCAM Human 人白细胞活化粘附因子Multi-class antibodies规格: 48T
CK-HMW 高分子量细胞角蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NR2C/NMDAR2C 谷受体2C抗体 规格 0.2ml
PBS (0.01M pH7.4) packages 磷酸盐缓冲液(0.01M pH7.4)(干粉包) 1000ml
TGF beta 2 英文名称: 转化生长因子β2(TGFβ2)抗体 0.1ml
C7orf44 英文名称: 7号染色体开放阅读框44抗体 0.2ml
CK-HMW 高分子量细胞角蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Goat Bovine IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗IgG 0.1ml
FRMD4A 英文名称: FRMD4A蛋白抗体 0.2ml
结肠癌抗原糖蛋白A33抗体 GPA33 0.2ml
Phospho-HP1 gamma (Ser83) /FITC 荧光素标记磷酸化染色质相关蛋白1-γ抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SGK1 (Thr256) 磷酸化糖皮质调节激酶1抗体 规格 0.1ml
Rabbit human IgM 兔抗人IgM (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg
小鼠T细胞;CTLL-2LEIBOVITZ’S L15培养基1/10升(片剂)游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒--动物,人
ISCOVE’S MDM培养基1/10升(片剂)L-赖乙酯
GRACE’S 昆虫培养基1/10升(片剂)人葡萄糖酶(GCK)ELISA试剂盒,GCK ELISA
干细胞检测试剂专题小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒,
名称规格小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒,
胚胎干细胞(ES)基础培养基500毫升小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒,
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)*培养基500毫升抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒--动物,人
胚胎干细胞培养生长因子5毫升百日咳素(PT)ELISA试剂盒--动物,人
胚胎干细胞基质胶溶液10毫升血吸虫(schistosoma)ELISA试剂盒--动物,人
胚胎干细胞补充培养基100毫升轮状病抗原(RV Ag)ELISA试剂盒--动物,人
人体胚胎干细胞条件培养基100毫升钙调素(CAM)ELISA试剂盒--动物,人
人体胚胎干细胞*培养基100毫升小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒,
小鼠胚胎干细胞*培养基100毫升小鼠β内酰酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒,
大鼠胚胎干细胞*培养基100毫升小鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒,
滋养细胞法胚胎干细胞繁殖试剂盒10次小鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒,
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