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当前位置:首页产品中心定量PCR试剂盒探针法荧光定量PCR试剂盒50T猪巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

猪巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
产品简介

猪巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。

更新时间:2020-09-30
厂商性质:经销商
访问量:369
产品型号:50T
详细介绍在线留言

【产品名称】猪巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Porcine Cytomegalovirus (PCMV,2)
【产品编号】YSP7096
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。

PCR实验方法步骤:
猪巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1

实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
Ginsenoside Rb2胰岛素样生长因子2受体检测试剂盒10mg

环氧泽泻;Alismoxide 规格: 20mg 订购|咨询 S-180(小鼠肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2

Mogroside Ⅴ阿扎胞苷相关物质C标准品规格:规格:人醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒 0.2ml

人CINC2a/bG Protein alpha Inhibitor 1  G蛋白α抑制蛋白1抗体规格:96T/48TDesosaminylazithromycin规格:200mgT淋细胞亚群检测试盒10mg人神经胶质瘤细胞,LN18细胞1x10^6cells

Ginsenoside Rb1胰岛素样生长因子结合蛋白1检测试剂盒20mg

OSI-420,游离碱(去甲埃罗替尼) 质量规格:国进口 OSI-420, Free Base (Desmethyl Erlotinib) YM琼脂/YM Agar霉菌/酵母菌和耐菌的分离培养250克国产/进口

Punicalagin阿扎红霉素A标准品规格:规格:人载脂蛋白A2(Apo-A2)Polyclonal Antibody 0.2ml

人CINC3DSPP/Dentin phosphophoryn  牙本质蛋白抗体规格:96T/48TNDemethylazithromycin规格:100mgT淋细胞亚群检测试盒10mg人神经母细胞瘤细胞,SHSY5Y细胞1x10^6cells

98%1g1g纤维素酶R10Hypersensitive troponin T

四螨嗪(分析标准品,98.6%) 质量规格:分析标准品,98.6% Clofentezine

Maconkey Agar No.3用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)类免疫缺陷病抗体检测试盒20mg可溶性E选择素检测试盒sPselectin

98%2501g纤维素酶R10Checkpoint Kinase 1

 人腺细胞英文名称:Hs 578T

SMAC大肠杆菌O157:H7的选择性分离培养神经源性丝氨蛋白酶抑制检测试盒20mg可溶性P选择素检测试盒SolubleIntercellularAdhesionMolecule1

>98%(GC)500ml5g纤维素酶(绿色木)Myelin Transcription Factor 1

非草隆(标准品) 质量规格:分析标准品 Fenuron

MUGMedium(with Kovacs)大肠埃希氏菌快速荧光测定β内啡肽受体检测试盒20mg可溶性细胞间粘附分子1检测试盒solubleThrombomodulin
猪巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒常春藤皂苷B CAS号: 36284772 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

竹节香附素A CAS号: 89412793 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

刺五加苷E CAS号: 39432569 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

紫香苷(刺五加苷B) CAS号: 118343 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

刺五加皂苷B CAS号: 114902168 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人参三 CAS号: 32791847 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人参二 CAS号: 19666763 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

原人参三 CAS号: 34080085 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

原人参二 CAS号: 30636909 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

拟人参皂苷RT5 CAS号: 98474783 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人参皂苷Rf CAS号: 52286585 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人参皂苷Rd CAS号: 52705938 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人参皂苷Re CAS号: 51542564或52286596 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人参皂苷Rc CAS号: 11021140 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人参皂苷Rh3 CAS号: 105558267 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。

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