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定量PCR试剂盒
探针法荧光定量PCR试剂盒
50T淋病奈瑟菌探针法荧光定量PCR试剂盒
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ARTICLESPCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【产品名称】淋病奈瑟菌探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Neisseria gonorrhoeae
【产品编号】YSP6997
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。
PCR实验方法步骤:
淋病奈瑟菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
98%25g5g()二槲皮素106956matrix metalloproteinase 7
氨培养基 规格: 100g 用途: 用于鉴别细菌利用铵盐作为源并分解葡萄糖的试验。
白介素21(IL21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 TMUB2 蛋白 (His 标签)*250(g)
人PSelectincABL1/2(Tyr393/429) 化非受体酪氨激酶cAbl抗体规格:96T/48T规格:200mgDeltalike ligand4检测试盒20mg人黑素瘤细胞,WM2664细胞1x10^6cells
98%5g25g刻叶紫堇127184matrix metalloproteinase 3
芹糖甘草苷;甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Liquiritin apioside
补体因子B(CFB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 SUSD4 / Sushi domain-containing protein 4 蛋白 (Fc 标签)*250(g)
人肽盘生长子(PLGF)NFκB p105/p50(PhosphoSer373) 化细胞核子p50/k基结合核子抗体规格:96T/48T规格:100mgDickkopf 1检测试盒20mg人横纹肌瘤细胞,A673细胞1x10^6cells
98%500g25gγ谷氨酰转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)Thrombospondin type1 domaincontaining 7A antibody
胰月示-亚盐-环丝氨琼脂基础(TSC) 规格: 100g 用途: 用于食品和临床样本中产气荚膜梭菌的分离培养和计数(SN0177-92,ISO标准)。
Recomb Protein G 重组蛋白G进口、原装NaKATP酶检测试盒25gHuman/人Elisa试盒4876102
98%5g100gγ谷氨酰转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)phospholipase C δ1
吲哚(standard for GC,>99.5%(GC)) 质量规格:standard for GC,>99.5%(GC) Indole
GSTTag protein 重组谷胱甘肽S转移酶现货供应抗酒石性酶5检测试盒25gHuman/人Elisa试盒4876102
≥99%25g5gγ谷氨酰转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)phospholipase C
去氢延胡索甲素硝盐 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 大鼠颌下腺上细胞*培养基100mL
Cholesterol 胆固醇*TRAP5检测试盒5gHuman/人Elisa试盒487683
淋病奈瑟菌探针法荧光定量PCR试剂盒丹皮新苷 CAS号: 100291869 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
4βD葡萄糖1,3,7三羟 CAS号: 81991993 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
7O杧果苷 CAS号: 31002127 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
北美芹素 CAS号: 13161756 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
丹皮原苷 CAS号: 72520924 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
管花苷A CAS号: 112516059 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
闹羊花毒素V CAS号: 37720868 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
闹羊花毒素III CAS号: 26342665 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
闹羊花毒素II CAS号: 26116892 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
11O异酰12O酰通关 CAS号: 1260252183 规格: HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
D核糖? CAS号: 50691 规格: HPLC≥98%;100mg 订购|咨询
竹红菌素 CAS号: 137592268 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
原伪金丝桃素 CAS号: 54328095 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
愈创甘油 CAS号: 93141 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
异鼠李素 3O半乳糖苷 CAS号: 6743926 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
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