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定量PCR试剂盒
探针法荧光定量PCR试剂盒
50T奈瑟菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒
产品展示
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ARTICLES实验过程:
一、奈瑟菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
1. DNA模板
2.产品仅用于科研对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
参数规格:
产品名称:奈瑟菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Neisseria spp.
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
以下是公司正在热销的产品:
Silymarin孕和adipoQ 受体家族成员Ⅶ检测试剂盒20mg
血小板反应蛋白(THBS1)重组蛋白英文名称:Recombinant Thrombospondin 1 (THBS1)
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ACTN3(Human AlphaActinin 3) ELISA Kit 人α辅肌动蛋白3CAS号:781 氨氨基转移酶检测试盒500gHuman/人Elisa试盒30652110
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青蒿(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Artemisic acid
亮氨丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 标签)*250(g)
hsCRP(Human high sensitivity CReactive Protein) ELISA Kit 人超敏C反应蛋白CAS号:731959 天门冬氨氨基转移酶检测试盒5gHuman/人Elisa试盒30674807
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标准溶液(1000μg/ml,基体:1mol/L HNO3) 质量规格:1000μg/ml,基体:1mol/L HNO3 Zinc standard 叠化物葡萄糖液态培养基 规格: 250g 用途: 用于水和污水中粪性链球菌发酵法的推测试验(CJ/T148-2001和SN/T2206.5-2009)。
BetaAmyloid (3135) β淀粉样肽3135(多肽蛋白)现货供应细胞色素氧化酶检测试盒500mgHuman/人Elisa试盒488108
Cy5.55mg
TAN[=1-(2-噻唑偶)-2-萘酚](>99.0%(T)) 质量规格:>99.0%(T) TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol] 赭曲霉 Aspergillus ochraceus杆菌属 Lactobacillus sp.
BetaAmyloid(128) β淀粉样肽128(多肽蛋白)*D木糖检测试盒100mgHuman/人Elisa试盒488175
姜黄二; 莪二Cy5N羟基琥珀酰亚 5mg
桑皮苷A 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg 4号染色体开放阅读框27抗体 Col Ⅲ ELISA Kit Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒
BetaAmyloid(140) β淀粉样肽(140)(多肽蛋白)进口、分装酰胆碱转移酶检测试盒25mgHuman/人Elisa试盒488175
奈瑟菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒槲皮素7OαL鼠李糖苷 CAS号: 22007723 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
槲皮素3龙胆二糖甙 CAS号: 7431836 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
诃子林鞣 CAS号: 18942262 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
海柯皂苷元 CAS号: 467550 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
覆盆子葡萄糖苷 CAS号: 38963949 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
二氯 CAS号: 2156561 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
儿茶精水合物 CAS号: 88191484 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
对羟 CAS号: 501973 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
短叶苏木 CAS号: 18490954 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
地骨皮素 CAS号: 164991677 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
地骨皮素 CAS号: 75288969 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
灯盏花素 CAS号: 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
刺五加苷A CAS号: 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
草夹竹桃苷 CAS号: 531282 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
苍术苷盐 CAS号: 102130438 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DN段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好。
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