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定量PCR试剂盒
探针法荧光定量PCR试剂盒
50T挤奶工结节病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
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ARTICLES实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
【产品名称】挤奶工结节病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Milker's Nodule Virus(MNV)
【产品编号】YSP6926
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。
PCR实验方法步骤:
挤奶工结节病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
非模式菌株Antibody分子式:C16H12O6性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA13 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CD55 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C27H30O16性状:Powder纯度:98.5%
Anti-ANXA2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-AMHR2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C17H16O6性状:Powder纯度:98.0%
Anti-ANXA2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MSR1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C17H14O6性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA2R Polyclonal Antibody英文名称: Anti-TRAF2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C33H40O21性状:Yellow powder纯度:98.5%
Anti-ANXA3 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PTK2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C35H36O14性状:Powder纯度:97.0%
Anti-ANXA3 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-NSUN6 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C32H22O10性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA3 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-AIFM3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C33H24O10性状:Yellow powder纯度:97.5%
Anti-ANXA4 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CBX7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C39H32O14性状:Yellow powder纯度:97.0%
Anti-ANXA4 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-HOOK1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C21H20O12性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA5 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MMP2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C27H30O17性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA5 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-EIF3F Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H34O5性状:Yellow powder纯度:96.0%
Anti-ANXA5 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-DNTT Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C33H38O15性状:Yellow powder纯度:95.0%
Anti-ANXA5-HRP Polyclonal Antibody英文名称: Anti-EXOSC3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C27H30O16性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA6 Monoclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-STK11 Polyclonal Antibody分子式:C27H30O15性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA6 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PSCA Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H22O12性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-HRAS Polyclonal Antibody分子式:C23H24O12性状:Yellow powder纯度:92.0%
Anti-ANXA8 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-H6PD Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H22O12性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA8 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-LAMP2 Polyclonal Antibody分子式:C30H20O11性状:Yellow powder纯度:98.0% Securinol A特异性: 大鼠CCK mRNA原位杂交试剂盒
Securitinine特异性: 人CCAR1 mRNA原位杂交试剂盒
Asimilobine特异性: 人、大鼠CCKAR mRNA原位杂交试剂盒
Norarmepavine特异性: 大鼠CCKBR mRNA原位杂交试剂盒
N-Methylcoclaurine特异性: 人、大鼠、小鼠CCL21 mRNA原位杂交试剂盒
Virosine B特异性: 人CCL11 mRNA原位杂交试剂盒
Daphnicyclidin H特异性: 小鼠、人CCL28 mRNA原位杂交试剂盒
Anti-ANXA8L2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CXCR7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C39H32O14性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ANXA9 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-SYT7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C33H40O21性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-AOC1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MAPK1/MAPK3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C37H30O16性状:Brown powder纯度:97.0%
Anti-AOC1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-TJP1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H26O12性状:Brown powder纯度:97.5%
Anti-AOC3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-CGB3 Polyclonal Antibody分子式:C30H20O10性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-AOX1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CSNK2B Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C45H38O18性状:Brown powder纯度:97.5%
Anti-AP1B1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-DUSP19 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C31H20O10性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-AP1G1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-COL4A3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H22O10性状:Powder纯度:98.0%
Anti-AP1M2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-C21orf33 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H20O10性状:Yellow powder纯度:97.5%
Anti-AP1M2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CD11C Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C44H34O20性状:Brown powder纯度:97.0%
Anti-AP2A1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-FZD4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C25H20O10性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-AP2A1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-TNFSF11 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H26O12性状:Brown powder纯度:98.0%
Anti-AP2A2 Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名称: Anti-COL3A1 Monoclonal Antibody分子式:C15H12O5性状:Brown powder纯度:98.0%
Anti-AP2M1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-GLS Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H20O10性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-AP3B1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-YAP1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H18O10性状:Yellow powder纯度:96.5%
Anti-APAF1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-APP Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H18O10性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-APEH Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ORM2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C21H20O11性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-APEH Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MAPK8 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C25H26O6性状:Powder纯度:98.0%
Anti-APEX1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ATG7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C23H24O11性状:Yellow powder纯度:98.5%
Anti-APEX1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-SIRT3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C17H14O6性状:Yellow powder纯度:98.0% Daphnicyclidin D特异性: 人CCL26 mRNA原位杂交试剂盒
Daphnicyclidin F特异性: 大鼠、小鼠CCR3 mRNA原位杂交试剂盒
Daurisoline特异性: 大鼠CCR2 mRNA原位杂交试剂盒
Strictosidinic acid特异性: 大鼠CCR6 mRNA原位杂交试剂盒
Lumichrome子囊菌类酵母菌。
挤奶工结节病毒探针法荧光定量PCR试剂盒KCa2.2阿卡波糖 质量规格:>97%,细胞培养级纯度:≥99%
阿卡波糖(标准品) 质量规格:HPLC>95%,标准品纯度:≥97%
阿昔洛韦,无环鸟苷 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养纯度:≥98%
阿昔洛韦,无环鸟苷(标准品) 质量规格:HPLC>98%,标准品纯度:≥98%
腺苷;腺嘌呤核苷 质量规格:BR,>99%,细胞培养级纯度:97%
腺嘌呤核苷(腺苷)(标准品) 质量规格:HPLC>98%,标准品纯度:≥95% 盐阿地芬宁 质量规格:含量> 99%纯度:≥98%
盐阿地芬宁(标准品) 质量规格:HPLC>98%,标准品纯度:≥97%
醋阿拉瑞林/瑞林 质量规格:>98%,BR纯度:≥98%
阿仑磷 质量规格:>99%,USP纯度:≥98%
阿仑磷 质量规格:HPLC>98%,标准品纯度:≥98%
别嘌 质量规格:>99%,超纯纯度:≥97%
别嘌(标准品) 质量规格:HPLC>98%,标准品纯度:≥97%
基雌;雌 质量规格:含量≥98.0%纯度:≥98%
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