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定量PCR试剂盒
探针法荧光定量PCR试剂盒
50T灰马杜拉分枝菌探针法荧光定量PCR试剂盒
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ARTICLES【产品名称】灰马杜拉分枝菌探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Madurella grisea
【产品编号】YSP6900
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。
PCR实验方法步骤:
灰马杜拉分枝菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
非模式菌株研究子囊菌类酵母菌。阿米C21H31NO性状:Powder纯度:98.0%
Anti-ACAT1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-NLRP3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C23H35NO性状:Powder纯度:98.0%
Anti-ACAT2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PECAM1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C36H42N2O9性状:Powder纯度:95.0%
Anti-ACCN1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Insulin Glargine Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C36H42N2O8性状:Powder纯度:96.0%
Anti-ACD Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-MAP2K2 (phospho Thr394) Polyclonal Antibody分子式:C18H19NO4性状:Powder纯度:97.5%
Anti-ACE Monoclonal Antibody宿主: Mouse 英文名称: Anti-CTNNB1 Monoclonal Antibody分子式:C20H17NO6性状:Powder纯度:98.0%
Anti-ACE Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-HSPD1 Polyclonal Antibody分子式:C22H20N2O5性状:Yellow powder纯度:98.5% Yunaconitoline特异性: 大鼠Arc mRNA原位杂交试剂盒
8-Deacetylyunaconitine特异性: 人、大鼠、小鼠AQP5 mRNA原位杂交试剂盒
Hypoxanthine特异性: 人、大鼠、小鼠ARF1 mRNA原位杂交试剂盒
Yunaconitine特异性: 小鼠ARNTL mRNA原位杂交试剂盒
3-Acetylyunaconitine特异性: 小鼠ARRB2 mRNA原位杂交试剂盒
Hirsuteine特异性: 人、大鼠、小鼠、鱼Aromatase mRNA原位杂交试剂盒
Thalirugidine特异性: 大鼠ASIC 1a mRNA原位杂交试剂盒
Anti-ACE Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MMP2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H24N2O2性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-ACE2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Phospho-Akt1 Monoclonal Antibody宿主: Mouse分子式:C21H25NO4性状:Powder纯度:98.5%
Anti-Acetyl-Histone H3-K14 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-BECN1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C7H15NO3性状:Powder纯度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H3-K18 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-EGFR Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C10H17N3O6S性状:Powder纯度:98.5%
Anti-Acetyl-Histone H3-K27 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-VEGFA Polyclonal Antibody分子式:C13H16N2O2性状:Powder纯度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H3-K56 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-EP3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H16N3O性状:Yellow powder纯度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H3-K9 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-DDIT3 Polyclonal Antibody分子式:C12H9NO2性状:Powder纯度:99.0%
Anti-Acetyl-Histone H4-K8 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Strep tag Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C12H9NO3性状:Powder纯度:%
Anti-ACHE Polyclonal Antibody英文名称: Anti-LYVE1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H17NO2性状:Powder纯度:%
Anti-ACHE Polyclonal Antibody英文名称: Anti-LILRB4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H24N2O性状:Powder纯度:%
Anti-ACKR2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PRKAB1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C18H19NO2性状:Powder纯度:%
Anti-ACKR3 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MCM5 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C8H7NO性状:Powder纯度:%
Anti-ACLY Monoclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-CASP6 Polyclonal Antibody分子式:C20H19NO4性状:Powder纯度:%
Anti-ACLY Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CD3 (FITC) Monoclonal Antibody宿主: Mouse分子式:C7H10N2O2性状:Powder纯度:%
Anti-ACMSD Polyclonal Antibody英文名称: Anti-RPSA Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:株研究子囊菌类酵母菌。香槟酒酵母
灰马杜拉分枝菌探针法荧光定量PCR试剂盒LAMP-2抗体(C末端) LAMP-2 Antibody (CT) (LAMP-2, Lysosome associated membrane protein 2)
LAMP2抗体 LAMP2 Antibody,Lysosomal-associated membrane protein 2,CD107B,Cluster of Differentiation 107B,LAMP2,LAMP-2,LAMP 2
LAMP-1抗体(中间区域) LAMP-1 Antibody (Center) (LAMP-1, Lysosome associated membrane protein 1)
LaminB1抗体 Lamin B1 Antibody,LMNB1,LMN,LMNB,LMN2,Lamin-B1,ADLD,MGC111419
LaminB1抗体 Lamin B1 Antibody,LMB1,LMNB1,LMNB 1,LMNB,LaminB1,LMN
LaminA抗体 Lamin A Antibody,LMNA,HGPS,EMD2,FPLD,CDCD1,LDP1,LGMD1B,IDC,Lamin-A/C,CDDC ,LMN1,CMD1A,PRO1
Lactalbumin抗体 Lactalbumin Antibody
L3MBTL1 L3MBTL1 polyclonal antibody (L3MBTL, L3MBT)
L1细胞粘附分子 NCAM-L1 Polyclonal Antibody
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
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