利什曼原虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

实验过程：
一、利什曼原虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
1. DNA模板
2．产品仅用于科研对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
参数规格：
产品名称：利什曼原虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Leishmania spp.
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

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产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
以下是公司正在热销的产品：
非模C27H32N2O10性状：Powder纯度：98.0%    °C分子式：C22H25N3O4性状：Powder纯度：98.0%
兔抗猴IgM英文名称: Human IgG/FITC储存条件: -20℃分子式：C22H35NO6性状：Powder纯度：97.0%
兔抗鸡IgG英文名称: BSA/HRP储存条件:  -20°C分子式：C22H23N3O4性状：Powder纯度：97.0%
兔抗鸡IgM英文名称: Goat anti-BSA储存条件: -20°C分子式：C18H11NO5性状：Brown powder纯度：97.0%
兔抗马IgG英文名称: Rabbit Anti-mouse IgG储存条件: -20℃分子式：C19H11NO6性状：Orange powder纯度：90.0%    3β-Isodihydrocadambine特异性: 人、大鼠、小鼠Aclenylylcyclase mRNA原位杂交试剂盒
Tyramine hydrochloride特异性: 人、大鼠、小鼠.兔Actin mRNA原位杂交试剂盒
Trolline特异性: 人ACTA2 mRNA原位杂交试剂盒
5-Carboxystrictosidine特异性: 人、大鼠、小鼠Actinin/Skeltal Muscle mRNA原位杂交试剂盒
4,5-Dihydropiperlonguminine特异性: 人、大鼠、小鼠Actinin/Smooth Muscle mRNA原位杂交试剂盒
14-O-Acetylneoline特异性: 蜜蜂ACOR1 mRNA原位杂交试剂盒
Sinomenine特异性: 人Activin A mRNA原位杂交试剂盒
兔抗牛IgG?英文名称: Human Fibrinogen/HRP储存条件: -20℃分子式：C34H37N3O6性状：Powder纯度：98.0%
兔抗牛IgM英文名称: Goat anti-BSA储存条件: -20℃分子式：C23H37NO7性状：Powder纯度：98.0%
兔抗犬IgM抗体浓度: 10mg/ml英文名称: Rabbit anti-HRP分子式：C28H29NO7性状：Powder纯度：97.5%
兔抗人IgA英文名称: Rabbit anti-Goat IgG储存条件: -20°C分子式：C22H26N2O3性状：Powder纯度：98.0%
兔抗人IgG英文名称: Chicken IgG?储存条件: -20℃分子式：C22H26N2O4性状：Powder纯度：95.0%
兔抗人IgM英文名称: Anti-GAPDH Monoclonal antibody宿主: Mouse 分子式：C39H44N2O7性状：Powder纯度：98.0%
兔抗生物素抗体IgG储存条件: 4℃或-20℃冻存纯度: SDS-PAGE，90%以上；抗原性，免疫电泳法90%以上；溶剂为0.01mol/L pH7.2 PBS分子式：C21H21NO5性状：Yellow powder纯度：98.0%
兔抗水貂IgG储存条件: -20°C单位: 瓶分子式：C38H42N2O7性状：Powder纯度：97.5%
兔抗豚鼠IgG英文名称: Rabbit anti-Human IgA储存条件: -20°C分子式：C21H24N2O4性状：Cryst纯度：97.0%

​母。模式菌株
利什曼原虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒MBP标签小鼠单克隆抗体(9Y5),HRP偶联　Anti-MBP Tag Mouse Monoclonal Antibody (9Y5), HRP Conjugated

MBP（MBP-Tag）标签抗体（克隆号17D07）　Maltose Binding Protein - Tag （MBP-Tag） Antibody （Clone 17D07） （MBP-Tag）

MBD4抗体　MBD4 Antibody

MBD2a抗体　MBD2a Antibody

MBD2/3（克隆号106B691）抗体　MBD2/3 （Clone 106B691） Antibody （Methyl-CpG-Binding Domain 2/3）

MBD1抗体　MBD1 Antibody

MBD1　MBD1 polyclonal antibody （CXXC3， PCM1， RFT， Methyl-CpG-Binding Domain 1）

MBD1（克隆号100B272.1）抗体　MBD1 （Clone 100B272.1） Antibody （Methyl-CpG-Binding Domain 1）

Max结合蛋白1　MXI1 Polyclonal Antibody
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DN段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好。