SERPINA3重组兔单克隆抗体是一种蛋白酶抑制剂（Serpin），属于Serpin超家族成员，主要功能是抑制中性粒细胞弹性蛋白酶和肥大细胞类，参与炎症调节和血管紧张素转化酶（ACE1→ACE2）的转化过程‌。

SERPINA3重组兔单克隆抗体

英文别名：AACT_HUMAN; SERPINA3; alpha-1-antichymotrypsin; ACT; Cell growth-inhibiting gene 24/25 protein; Serpin A3; GIG24; GIG25; serpin family A member 3;

交叉反应：Human

抗体来源：Rabbit

免疫原：Full length native Protein : 1-423/423

亚型：IgG

性状：Lyophilized or Liquid

纯化方法：affinity purified by Protein A

克隆类型：Recombinant

克隆号：A12D5

理论分子量：45 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：PBS, Glycerol, BSA.

研究领域：Cardiovascular > Blood > Serum Proteins

Cell Biology > Proteolysis / Ubiquitin > Proteolytic enzymes > Other proteases

Neuroscience > Neurology process > Neurodegenerative disease > Alzheimer's disease > Proteases

简介：

α-1抗胰（SERPINA3，又称α-1抗，A1ACT）是一种蛋白酶抑制剂（Serpin），属于Serpin超家族成员，主要功能是抑制中性粒细胞弹性蛋白酶和肥大细胞类，参与炎症调节和血管紧张素转化酶（ACE1→ACE2）的转化过程‌。

产品特性：

‌抗体类型‌：重组兔单克隆抗体，通过基因工程技术制备，具有高特异性和低交叉反应性‌。

‌应用范围‌：适用于Western Blot（WB）、免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）等实验，可检测人、小鼠、大鼠等物种的SERPINA3蛋白表达‌。

实验方法：

1. ‌样本制备‌

‌组织样本‌：取新鲜组织（如肝、肺）或石蜡包埋组织，用PBS冲洗后匀浆，离心（12,000 rpm，10分钟）取上清液‌。

‌细胞样本‌：培养细胞用消化后裂解（含蛋白酶抑制剂），离心后收集上清‌。

2. ‌抗体稀释‌

‌推荐稀释比例‌：

Western Blot（WB）：1:1000-1:5000（含1% BSA的TBS-Tween 20缓冲液）‌。

免疫组化（IHC）：1:200-1:1000（需抗原修复）‌。

3. ‌Western Blot实验步骤‌

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‌电泳与转膜‌：SDS-PAGE分离蛋白后转至PVDF膜，5%脱脂牛奶封闭1小时‌。

‌孵育抗体‌：一抗4℃过夜，二抗（HRP标记）室温1小时‌。

‌显影‌：ECL化学发光法检测信号‌。

4. ‌免疫组化（IHC）‌

‌抗原修复‌：石蜡切片经柠檬酸钠缓冲液（pH 6.0）高压修复‌。

‌封闭与孵育‌：3% H₂O₂灭活内源酶，一抗4℃过夜‌。

‌显色‌：DAB显色，苏木精复染‌。

操作方法及相关技术要点：

一、抗体制备流程

‌免疫方案设计‌

采用健康新西兰白兔（2-3kg），以SERPINA3重组蛋白与弗氏佐剂（初免）或不佐剂（加强免疫）乳化后，通过皮下/肌肉注射免疫。抗原剂量为100-500μg/次，间隔2-4周加强免疫3-5次，通过ELISA监测血清效价‌。

‌B细胞分离与单克隆化‌

末次免疫后1-2周采集脾脏，研磨制备单细胞悬液，通过流式分选或有限稀释法获取特异性B细胞‌。

采用单B细胞技术时，需通过RT-PCR扩增重/轻链可变区基因，并克隆至表达载体‌。

二、抗体纯化与鉴定

‌表达与纯化‌

杂交瘤细胞或重组表达系统（如HEK293）培养后，通过蛋白A/G亲和层析或离子交换层析纯化抗体‌。

聚乙二醇化修饰需检测PEG残留量及错配异构体（RP-UPLC法）。

‌质量控制‌

‌活性检测‌：ELISA法测定与SERPINA3抗原结合活性，EC50值需符合标准。

‌纯度分析‌：SEC-HPLC检测单体含量（>99%），CEX-HPLC分析电荷异质性。

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