021-59963601

产品中心

PRODUCTS CNTER

当前位置:首页产品中心定量PCR试剂盒探针法荧光定量PCR试剂盒50T斑节对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

斑节对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
产品简介

斑节对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。

更新时间:2020-09-30
厂商性质:经销商
访问量:400
产品型号:50T
详细介绍在线留言

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1

【产品名称】斑节对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Penaeus Monodon-type Baculovirus(MBV)
【产品编号】YSP7058
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。

PCR实验方法步骤:
斑节对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
95%25g25g异原莪述醇205992A Disintegrin And Metalloprotease 33

 小鼠胎儿表皮角质形成层细胞*培养基100mL

白介素2(IL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (His 标签)*100(g)

人粒细胞巨噬细胞集落刺激子(GMCSF)XRCC4  X射线修复交叉互补蛋白4抗体规格:96T/48TArtemether Related Compound A规格:50mgp53自身抗体检测试盒10mg人膜间皮细胞,MET5A细胞1x10^6cells

95%100g1g郁金二26259450A Disintegrin And Metalloprotease 12

熊果 质量规格:HPLC≥85%,BR Ursolic acid

白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 SLAMF6 / Ly108 蛋白*250(g)

人生长子(GH)NLRX1/NOD26/NOD9  膜内在蛋白NOD26抗体规格:96T/48T规格:10mgPeriostin检测试盒250mg人男性正常细胞,Hs68细胞1x10^6cells

荧光素5mg

 NTM培养基/NTM Medium淋球菌的分离培养250克国产/进口

AR (Androgen Receptor)peptide  雄激素受体(多肽抗原)*鼠痘病抗体检测试盒100gHuman/人Elisa试盒495783

5mg

噻螨标准溶液(10μg/ml,u=6%) 质量规格:10μg/ml,u=6% Hexythiazox solution

5HTR2A  5羟色胺受体2A抗原进口、分装肺炎病抗体检测试盒25gHuman/人Elisa试盒49609849

中文名称5mg

茅苍术醇 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg 豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒,英文名:HGF ELISA Kit

普列克底物蛋白同源物样域家族A成员2检测试盒20mg干细胞子检测试盒Highdensitylipoprotein
斑节对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒L半胱氨 CAS号: 52904 规格: HPLC≥98%;200mg 订购|咨询

维生素A CAS号: 68268 规格: HPLC≥95%;20mg 订购|咨询

羊藿次苷I CAS号: 56725996 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

盐野靛碱 CAS号:  规格: HPLC≥99%;20mg 订购|咨询

杨芽黄素 CAS号: 520285 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

鸦胆子素D CAS号:  规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

药根碱 CAS号: 3621383 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

香草 CAS号: 121346 规格: HPLC≥97%;100mg 订购|咨询

香叶木素 CAS号: 520343 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

蒜氨 CAS号: 556274 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

三氯蔗糖 CAS号: 56038132 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

双香素 CAS号: 66762 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

茜素 CAS号: 72480 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

β蒎 CAS号: 18172673 规格: HPLC≥99%;0.5mL 订购|咨询

α蒎 CAS号: 7785264 规格: HPLC≥98%;0.5mL 订购|咨询

在线留言

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
热线电话:021-59963601

扫描微信号

Copyright © 2025 上海研生实业有限公司 版权所有    备案号:沪ICP备11012944号-18

技术支持:化工仪器网    管理登录    sitemap.xml