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黄绿青霉探针法荧光定量PCR试剂盒
产品简介

黄绿青霉探针法荧光定量PCR试剂盒所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

更新时间:2020-09-30
厂商性质:经销商
访问量:371
产品型号:50T
详细介绍在线留言

产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
参数规格:
产品名称:黄绿青霉探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Penicillium citreoviride
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DN段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好。

实验过程:
一、黄绿青霉探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
1. DNA模板
2.产品仅用于科研对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
以下是公司正在热销的产品:
95%5g5g4表莪术醇24579735Ureaplasma urealyticum antibody

 3%钠三糖铁琼脂 规格: 250g 用途: 用于副溶血性弧菌的生化反应。(GB、SN)

干扰素γ(IFNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 NFASC / Neurofascin 蛋白 (His 标签)*250(g)

人胶质细胞系来源的神经营养子(GDNF)MSX1  MSH同源蛋白1样蛋白抗体规格:96T/48TArtesunate规格:50mg前颗粒体蛋白检测试盒20mg人脑胶质瘤细胞,HS683细胞1x10^6cells

95%25g25g表莪术呋29232937CNTF

香叶木素 质量规格:≥98%,BR Diosmetin

内皮素1(EDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 (His 标签)*250(g)

人粒细胞克隆刺激子(GCSF)NIR1/RDGBA3  膜相关脂转运蛋白抗体规格:96T/48TArticaine规格:50mg有凸素1检测试盒20mg人脑胶质瘤细胞,A172细胞1x10^6cells

5mg

大黄(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Rhein 费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii串珠镰孢 Fusarium moniliforme

CasitoneBR纳豆激酶检测试盒20mg高密度脂蛋白检测试盒highdensitylipoproteincholesterol

罗丹明1235mg

银杏内酯C(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Ginkgolide C 人肝实质细胞*培养基酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

Peptone(From porcine meat)BR羧化酶检测试盒20mg高密度脂蛋白胆固醇检测试盒HighmobilitygroupproteinB1

JC10  5mg

C12E9, 10%溶液 质量规格:BR C12E9 Li-7(人肝细胞)5×106cells/瓶×2

Beef PeptoneBR激酶检测试盒20mg高迁移率族蛋白B1检测试盒Testoterone
黄绿青霉探针法荧光定量PCR试剂盒尿囊素 CAS号: 97596 规格: HPLC≥99%;20mg 订购|咨询

1,2,3,4,6O没食子酰葡萄糖 CAS号: 14937327 规格: HPLC≥99%;20mg 订购|咨询

雷内 CAS号: 74285862 规格: HPLC≥99%;20mg 订购|咨询

L羟脯氨 CAS号: 51354 规格: HPLC≥98%;100mg 订购|咨询

L精氨 CAS号: 74793 规格: HPLC≥98%;200mg 订购|咨询

加兰他敏 CAS号: 357700 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

茴芹内 CAS号: 131124 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

甘露 CAS号: 69658 规格: HPLC≥99%;100mg 订购|咨询

对羟(尼泊尔金) CAS号: 99763 规格: HPLC≥99%;100mg 订购|咨询

对羟 CAS号: 99967 规格: HPLC≥99%;100mg 订购|咨询

对羟醛 CAS号: 123080 规格: HPLC≥99%;100mg 订购|咨询

靛玉红 CAS号: 479414 规格: HPLC≥97%;20mg 订购|咨询

茶黄素3没食子 CAS号: 30462341 规格: HPLC≥93%;20mg 订购|咨询

茶黄素 CAS号: 1011850 规格: HPLC≥95%;20mg 订购|咨询

补骨脂宁 CAS号: 53947925 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

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