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匙状*毛样线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
产品简介

匙状*毛样线虫探针法荧光定量PCR试剂盒所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

更新时间:2020-09-29
厂商性质:经销商
访问量:331
产品型号:50T
详细介绍在线留言

实验过程:
一、匙状*毛样线虫探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
1. DNA模板
2.产品仅用于科研对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
参数规格:
产品名称:匙状*毛样线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Nematodirus spathiger
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。


产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
以下是公司正在热销的产品:
97%25g25g竹红素120809Stromal cell derived factor 1β

洋艾素 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Human Pigment epithelium-derived factor大鼠亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒,英文名:CYPB ELISA Kit

Salicin碘相关物质D标准品规格:规格:人载脂蛋白B(Apo-B)CLIA试剂盒 0.2ml

CT1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌营养素1CAS号:214 检测试盒25gHuman/人Elisa试盒30686738

99%500g1g4',5,8三羟基3',6,7三基黄108394Stromal cell derived factor 1α

己二醇(>98%,BR) 质量规格:>98%,BR Hexylene glycol 激肽释放酶5(KLK5)重组蛋白英文名称:Recombinant Kallikrein 5 (KLK5)

Silymarin碘相关物质E标准品规格:规格:人β抑制蛋白2(ARRB2)CLIA试剂盒 0.2ml

人神经营养子3(NT3)phosphoATF2 (Thr53)  化活化复制子2抗体规格:96T/48T规格:350mgD天冬氨氧化酶检测试盒20mg人急淋白血病细胞系,SUPB15细胞1x10^6cells

水晶兰甙6FAM CPG  *1000 Å*5mg

茴香(分析标准品,>99%(GC)) 质量规格:分析标准品,>99%(GC) p-Anisaldehyde

M2型激酶检测试盒20mgD二聚体检测试盒DLacticacid

6FAM CPG  *500 Å*5mg

 SGC7901(人胃细胞)5×106cells/瓶×2

寨卡病IgG抗体检测试盒20mgD乳检测试盒TypeIIACollagenNPropeptide

3'荧光素 CPG *1000 Å*5mg

己二二异辛酯(标准品) 质量规格:分析标准品 Bis(2-ethylhexyl)adipate

Deoxycholic acidBR,99%,有害品Benzonase核酶检测试盒20mgIIA型前胶原N末端肽检测试盒PCIII
匙状*毛样线虫探针法荧光定量PCR试剂盒紫杉C CAS号: 153415453 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

育亨宾碱 CAS号: 146485 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

异三尖杉宁碱 CAS号: 173101547 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

酰香 CAS号: 2478388 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

岩藻黄质 CAS号: 3351868 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

新鲁斯可皂苷元 CAS号: 17676334 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

新苦味素 CAS号: 76777 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

香紫苏二 CAS号: 55881964 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

西门木炔 CAS号: 159534891 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

西门木炔 CAS号: 557584 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

维司那定 CAS号: 477327 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

水苏碱 CAS号: 471874 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

十七碳 CAS号: 1731926 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

樟柳碱 CAS号: 76822349 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

加兰他敏 CAS号: 19453 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DN段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好。

 

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