原代细胞培养技术及hanks液的配制

细胞生物学生物大实验的时候有关动物细胞培养的大实验，在这里详细介绍了细胞培养中各种器皿的清晰和灭菌、培养基的配制、hanks液/d-hanks液等试剂的配制、细胞的传代培养及其冻存与复苏方法与操作步骤。原代细胞培养是用无菌操作的方法将动物体内的组织(或器官)取出，模拟动物体内的生理条件，在体外进行培养.使其不断地生长、繁殖，人们借以观察细胞的生长、繁殖、细胞分化以及细胞衰老等过程的生命现象。细胞培养的突出优点，一是便于研究各种物理、化学等外界因素对细胞生长发育和分化等的影响;...

原代细胞的基本结构及作用？

与其他系统一样，原代细胞同样有边界，有分工合作的若干组分，有信息中心对细胞的代谢和遗传进行调控。细胞的结构复杂而精巧，各种结构组分配合协调，使生命活动能够在变化的环境中自我调控、高度有序地进行。1.细胞壁（CellWall）【动物细胞没有】位于植物细胞的zui外层,是一层透明的薄壁。它主要是由纤维素和果胶组成的，孔隙较大，物质分子可以自由透过。细胞壁对细胞起着支持和保护的作用。2.细胞膜（CellMembrane)细胞壁的内侧紧贴着一层极薄的膜，叫做细胞膜。这层由蛋白质分子和...

原代细胞治疗可缓解眼压降低青光眼

研究人员将新生原代细胞注射到青光眼小鼠模型的眼内，发现新细胞的流入能够帮助小梁网状结构再生，该结构是眼部的一个排水管道能够帮助避免出现液体累积，如果液体在眼睛里累积会使眼压升高容易导致青光眼。这种疾病会损伤视神经，可能导致失明。"我们认为用健康细胞替代损伤或缺失的小梁网状细胞能够重新恢复小梁网状结构的功能。"文章作者Kuehn在他们实验室的上这样写道。相关研究结果发表在学术期刊PNAS上。这种方法的一个潜在优势就是利用病人自身皮肤细胞获得诱导多能干细胞，这样就能避开使用胎儿干...

诱导性细胞系可以定向分化吗

日本学者山中伸弥将oct4、Sox2、Klf4、c-myc四个基因插入到成体细胞系DNA中重编程细胞恢复到胚胎干细胞状态，由此建立了iPS细胞。这些细胞可以向胚胎干细胞一样，转变为几乎所有的组织类型。为此,山中伸弥在2011年获得诺贝尔奖。虽然iPS细胞有潜力发育为任何组织器官，但如何诱导它们往正确的方向分化问题尚未解决。由中科院上海生命科学院/上海交大医学院健康科学研究所金颖教授带队的关于“基于诱导多能干细胞技术的若干重大疾病模型与机理研究”的“973”科技部重大科学研究项...

原代细胞如何抵抗粘膜系统二次感染？

原代细胞是机体T淋巴细胞中的一个特殊亚群，它们在淋巴组织中的比例很低，但富集于上皮粘膜系统，比如皮肤，呼吸道，肠道以及道等等。这类细胞是T细胞分化过程中形成的细胞，在胚胎发育为新生个体的过程中会逐步地向各组织迁移。其中，TCR中保守的γ链对于γδT细胞的迁移以及功能的实现都十分关键。不过，新的证据表明γδT细胞的功能，主要是IL-17的表达，可能是在其离开胸腺的时候分化产生的，而γ链的表达与否并不重要。不管怎样，于γδT细胞从我们出生开始就分布在各个表皮粘膜层中，从而能够抵抗...

构建人类原始原代细胞

这是*次成功将人类原代细胞编程至这样的早期发育阶段。这项研究有可能帮助找到有关一些生育问题病因的答案，生成关于胚胎发育zui早期的一些新见解，并有潜力在未来促使开发出新型的生殖技术。多年来研究人员一直试图在培养皿中构建出人类原始生殖细胞。原始生殖细胞生成于胚胎发育的zui初几个星期里，此时受精卵中的胚胎干细胞开始分化为这一非常基础的细胞类型。一旦这些原始生殖细胞变为‘特化’细胞，它们会‘几乎自发’地继续朝着精子或卵子前体细胞发育。诱导多能干(iPS)细胞的诞生促使科学家们提出...

肿瘤细胞培养成纤维细胞排除法

肿瘤细胞刮除法：是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头（用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝）、或裹少许脱脂棉制成，装入试管中高压灭菌后备用（也可用特制电热烧灼器刮除）。刮除程序为：（1）标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位；（2）刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸入瓶皿中，肉眼或显微镜窥视下，刮除无标记空间；（3）用Hanks液冲洗一两次，洗除被刮掉的细胞；（4）注入培养液继续培养，如发现仍有成纤维细胞残留，可重复刮除至*除掉为止2．反复贴壁法：根据肿瘤细胞比成纤维细...

正确复苏原代细胞的方法

原代细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢?没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?请看下文：活力检查–千万不要使用不健康的细胞，可能有污染，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查–检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液–在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~5x106cells/ml(根据不同的细胞类型调整)冻存液–用冻...