培养细胞无菌操作注意事项

培养原代细胞无菌操作注意事项1、操作原代细胞进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方，瓶口zui易污染，加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸...

细胞系活性检测方法之乳酸脱氢酶（LDH）释放法

细胞系活性检测方法之乳酸脱氢酶（LDH）释放法LDH是活细胞浆内酶，当细胞损伤，细胞膜通透性变化时，会将LDH释放到培养液中。因此培养液中该酶的活性与被裂解的细胞系数量成正比。由LDH催化的酶促反应在催化乳酸生成丙酮酸的过程中使氧化型辅酶I（NAD）变成还原型辅酶I（NADH+H），后者再通过递氢体一吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原碘硝基氯化四氯唑（INT），INT接受氢离子被还原成紫红色的化合物，酶标仪检测其OD值。与结晶紫染色法和MTT比色法进行灵敏度、重复性和相关性比较，...

原代细胞取材的基本要求和注意事项

原代细胞取材的基本要求和注意事项人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，是进行细胞培养的*步，若取材不当，将会直接影响细胞的体外培养，现将取材的基本要求和注意事项叙述如下：一、取材的基本要求（1）取材要注意新鲜和保鲜新鲜组织易于培养成功，取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞，尽快入箱培养，若不能即时培养，应将组织浸泡于培养液内，于4℃存放。若组织块较大，应在清除表面血、坏死组织、脂肪和结缔组织后，切碎于培养液内4℃存放，但时间不能超过24h。对于已切碎的组织或血液、淋...