人类体细胞染色体标本制备实验原理和操作步骤

人类体细胞染色体标本制备实验原理和操作步骤实验原理染色体是在显微镜下可见原代细胞有丝分裂过程中出现的结构。因此，必须获得染色体标本才能进行检查分析，通常情况下，都是利用外周血淋巴细胞进行核型分析。正常情况下，人体外周血淋巴细胞不再分裂，但植物血凝素（PHA）可刺激血中的淋巴细胞转化成淋巴母细胞，使其恢复增殖能力。因此，可采取少量外周静脉血，做短期培养，培养至72小时细胞进入增殖旺盛期，此时加入秋水仙素抑制细胞分裂，使细胞分裂停止在中期以获得足够量的分裂期细胞，经低渗、固定、制...

培养原代细胞时哪些问题需要注意

培养原代细胞时哪些问题需要注意1.原代细胞用1640加10%胎牛血清，有的种系用DMEM.血清要求质量较高，在普通血清中细胞生长不太好。1640用双蒸水溶解，按说明加入碳酸氢钠。2.培养液中应加入HEPES，起缓冲pH值的作用，否则会影响细胞状态。如果用20%的HEPES，每次配培养液时每200ml培养液可加入5ml.加入HEPES后1640培养液颜色略呈橘黄色而非暗红色。3.消化所用胰酶可选择0.125%浓度，且不要消化时间太长。也有研究者认为不用胰酶，直接吹打使细胞脱壁，...

造血干细胞的基本特性

造血干细胞的基本特性造血干细胞的多向分化潜能使造血干细胞分化为各类祖细胞系,祖细胞又可以分化为各种类型的血细胞。在造血干细胞发育、成熟的过程中,除了分化为成熟的细胞,部分细胞会衰老、死亡。为了维持终生造血,造血干细胞会不断地进行自我更新。但是在一次次的DNA复制和细胞分裂中又增加了突变的可能。在成体中,70%的HSC处于静息状态,这种状态可使终生存在的造血干细胞可以尽可能减少由于增殖带来的基因组不稳定性,降低细胞应激带来的伤害。当造血干细胞受到信号刺激时,静息的造血干细胞就会...

杂交瘤细胞技术分析

杂交瘤细胞技术分析克隆化的细胞可以在体外进行大量培养，收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限，其不能超过特定的细胞浓度，且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。杂交瘤细胞具有从亲代淋巴细胞得来的肿瘤细胞的遗传特性。如接种到组织相容性的同系小鼠或不能排斥杂交瘤的小鼠（无胸腺的裸鼠），杂交瘤细胞就开始无限地繁殖，直至宿主死亡。产生肿瘤细胞的小鼠腹水和血清中含有大量的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体，这种抗体的效价往往高于培养细胞上清液...

体外培养的细胞系差异和分化

体外培养的细胞系差异和分化1、差异：细胞系离体后，失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响，生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中，日久天长，易发生如下变化：分化现象减弱；形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡；或发生转化获得不死性，变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此，培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体，它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能，也有一些不同于体内细胞的性状。实际上从细胞一旦被置于体外培养后，这种差异就开始发生了。虽然体外细胞与机体细胞存...

选购细胞株需要考虑哪几个因素

选购细胞株需要考虑哪几个因素1、细胞株的生物等级，由于有些细胞株及菌株属于管制品，所以从国外购货比较麻烦。2、报关时尽量提供比较充足的证明材料，以免担搁时间而导致干冰挥发完细胞株死亡，甚至于被退回给发货人。选购细胞株注意事项3、在购买国外细胞株时，需交待国外加比较多的干冰一般在13公斤以上，采用比较密封的泡沫盒加套纸箱。4、如果通过国外细胞株在国内的代理商购买的话，合同中需注明以下一些内容：1）.明确的到货时间，这个时间需注明的是工作日，还是普通日。2）.在接到细胞株后，要求...

原代细胞生物学从哪几个方面学习

原代细胞生物学从哪几个方面学习*、认识原代细胞生物学课程的重要性，正如原子是物理性质的zui小单位，分子是化学性质的zui小单位，细胞是生命的基本单位。50年代以来诺贝尔生理与医学奖大都授予了从事细胞生物学研究的科学家，可见细胞生物学的重要性。如果你将来打算从事生物学相关的工作，学好细胞生物学能加深你对生命的理解。第二、明确细胞生物学的研究内容，即：结构、功能、生活史。生物的结构与功能是相适应的，每一种结构都有特定的功能，每一种功能的实现都需要特定的物质基础。如肌肉可以收缩、...

原代细胞HEPES缓冲液的使用方法及配制

原代细胞HEPES缓冲液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH调pH至7.2，滤过除菌后使用。原代细胞此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L)，使用前取99ml培养液加入lml贮存液，zui终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中，用...