肿瘤细胞活力评估难度低

传统的肿瘤细胞培养主要是通过显微镜下形态学变化以及传代培养周期的变化预估细胞生长生存状态。这种主观判断既无法量化，也无法进行统计学分析。因此，目前对细胞存活质量的判断并没有准确、客观的统一标准，并且对体外培养细胞的存活质量控制往往被科研工作者们“忽略”，从而导致实验结果的不稳定。体外细胞的有效培养新概念——“细胞质控”。通过细胞活力、细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖及DNA损伤五方面对细胞生长生存状态进行的监控。在这五个方面中，影响zui大的便是细胞活力，下面咱们专门来谈一谈细胞...

原代细胞中的核糖核酸可分为哪些种类？

根据原代细胞结构和功能的不同，细胞中的RNA可分为三类：即信使（mRNA）、转运RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）。mRNA以DNA为模板，在RNA聚合酶的催化下，按碱基互补原则，从分子的5，末端向3，末端方向在细胞核内合成，因此，mRNA分子能准确地传递DNA链上的遗传信息。合成后的mRNA经核孔进入细胞质，并与核糖体结合，将单核糖体连成多核糖体。由于细胞内的基因和基因组很多，而mRNA是根据要表达的基因或基因组合成的，因此mRNA种类复杂多样。tRNA是RNA中...

原代细胞培养新技巧

研究人员发现了一个能提高人类原代细胞，以及诱导多能干细胞iPS三倍数量的新方法，而且这种方法还无需一般培养方法中都需要的小鼠饲养细胞。胚胎干细胞和iPS细胞由于其杰出的再生能力，吸引了众多科学家，这些多能干细胞是许多疾病的新希望，比如帕金森症，阿兹海默症等，也是筛选信号的新方向，同时这些细胞还能为糖尿病，神经或其它组织损伤提供移植治疗细胞。但是这些技术应用需要百万，甚至千万的细胞，目前的培养方法无法达到这一需求。而的这篇文章在之前研究的基础上——帮助研究人员了解了*的表面化合...

如何对原代细胞进行保存和培养？

原代细胞形成的单层细胞汇合以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生成空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭，都将影响细胞的生长，这一程序常称为传代或传代培养。原代培养在传代时即为细胞系，能连续培养下去的为连续细胞系；不能连续培养的为有限细胞系。通常，传代培养是指扩大培养，也就是将一份细胞一分为二或者一分为三进行培养等。但严格说来，不论稀释与否，将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶即称为传代或传代培养。可以理解，在任何时候，细胞从一个瓶子接种到另一个瓶子时总会丢失一部分，因...

肿瘤细胞增殖检测：3H同位素渗入法实例

一、原理肿瘤细胞在有丝分裂原PHA、ConA等的刺激下，产生增殖反应，DNA和RNA合成明显增加，如在培养液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料RPMI-1640细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇（2-ME）、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS缓冲液（pH7.2-7.4）、3H-TdR、闪烁液[2，5-二苯基恶唑（PPO）0.5g、1，4-双-（5-苯基...

细胞株双重效果

在细胞株早期的研究中，SohailTavazoie实验室已研究了一个被称作ApoE的基因及其在抑制黑色素瘤从它的原发性部位扩散到其他器官中的作用。他们已发现增加ApoE表达通过破坏癌细胞浸润健康组织和长出血管的能力来导致下降的肿瘤转移。当这些研究人员发现了激活ApoE表达的药物在那些具有健康免疫系统的小鼠中比在那些没有健康免疫系统的小鼠中能够更加有效时，事情就开始变得更加有趣了。除了抗肿瘤转移作用之外，这些药物似乎通过降低这些小鼠中的MDSC水平来影响免疫反应，并因此激活抗肿...

原代细胞极化过程

原代细胞极性对于细胞的分化、发育与功能发挥起着举足轻重的作用，其破坏与肿瘤生成及转移密切相关。细胞极性建立的共性，是一些极性蛋白复合物被特异地招募到膜区域，并发生显着的局部聚集，然而具体机制仍未阐明。研究人员发现，Numb的PTB结构域以一种非典型的模式特异性识别Pon中的重复模序，这种多位点结合诱导该复合物发生液-液相变（liquid-liquidphasetransition，LLPT）分离，在体外和细胞中能够自发组装形成致密的无膜液相结构。而这种相变液滴可以被NumbP...

原代细胞生长的检查方法

1.原代细胞直接计数法是zui简单的检测细胞生长的方法。计数细胞一般利用台盼蓝(锥虫蓝染色，台盼蓝(锥虫蓝)不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色。而死亡细胞的细胞膜通透性增高，可使染料进入细胞内而使细胞着色。因此，镜下未染色细胞认为是活细胞，而染色细胞认为是死亡细胞。经典的细胞计数常用到血细胞计数板。细胞消化成单个细胞后，将细胞悬液加入血盖片和计数板之间的空隙中，通常我们计数计数板的四角大方格(每个大方格又分16个小方格)内的细胞数。计完数后，需换算出每ml悬液中的...