细胞株状态不好的解决方法

细胞株是生物体形态结构和生命活动的基本单位。通常认为细胞是人体的zui小单位，它是由许多更小的具有自身功能的结构组成。尽管人类细胞大小不等，但所有的细胞均很小。即使是zui大的细胞如受精卵，也是肉眼所不能见到的。细胞状态不好，可能是血清中有黑胶虫。解决方法如下：1.换好一点的血清。2.用无菌的PBS洗几次，可一定程度上缓解。注意好实验环境要，保持细胞间整个环境的洁净度。3.换用进口的一次性塑料培养瓶。4.建议清理无菌室所有物品，重新灭菌，用KMnO4熏蒸，按使用无菌室做，细胞...

原代细胞试探性的开端

研究人员成功培养出来自小鼠胚胎的原代细胞。他们很快意识到这项发现的巨大潜力，因为这些细胞既能自我复制，又可被推动变成身体200余种细胞类型中的任何一种。不过，此项技术并不容易在灵长类动物身上实现。威斯康辛大学麦迪逊分校生物学家JamesThomson花了14年时间，才将该技术成功用于猴子。3年后，Thomson利用生育治疗中未使用的捐赠胚胎，创建了人类ES细胞系。此项发现激起了一场道德风暴。批评者——大多数来自宗教界——认为胚胎构成了人类的一部分，并且想阻止任何涉及破坏胚胎的...

细胞株的形态学观察和检定

细胞株的形态学观察及鉴定：细胞换液后直接在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特征，并作相差摄影，同时进行常规HE染色观察并摄片。鉴定采用DAB免疫组织化学法，在6孔培养板中放置载玻片，在玻片上植入2ml含有1×106的细胞悬液，待细胞贴壁后，取出载玻片，放入-20℃的冷丙酮中固定30min,用PBS冲洗3次，每次2min,滴加3%H2O2室温孵育10min，PBS冲洗3次，每次2min,以消除内源性过氧化物酶的活性。滴加兔抗人Ⅷ因子相关抗原多抗工作液，放入湿盒内4℃过夜，同时另...

肿瘤细胞如何进行传代？

肿瘤细胞是科研实验中常用到的细胞，当人脐静脉内皮细胞达到90%融合时，需要对细胞进行传代培养。首先培养瓶的准备：用纤维粘连蛋白（BPF，货号#8248）包被培养瓶，包被浓度为2ug/cm2，包被时间为4度过夜或37度一小时。将培养基（ECM，货号#1001）、胰酶/EDTA消化液（T/S，货号#0103）、胰酶中和液（TNS，货号#0113）和无钙镁离子的磷酸盐缓冲液（DPBS，货号#0303），温度回复至室温，我们不推荐用37°C水浴加热试剂和培养基。弃去原培养瓶中培养基，...

原代细胞因子中全血的标本处理方法

原代细胞因子中全血的标本处理方法分析：我们针对全血：使用肝素钠抗凝的真空采血管采血，不易采用肝素锂、EDTA和ACD抗凝剂，血样在8小时内分析，超过8小时会导致活性的损失，一般细胞因子阳性细胞会减少5%。如不能在8小时之内检测，应将真空采血管水平室温放置。自身血浆中外周血单个核细胞（PBMCs）：使用肝素钠抗凝的采血后，分离PBMCs，24小时内分析。组织培养基中的外周血单个核细胞（PBMCs）：用Ficoll分离PBMCs，将细胞重悬于含10%热灭活胎牛血清（FBS）的RP...

细胞系如何分配任务并解决问题

从生物学角度了解不同类型细胞系如何一起工作是一个极大的未知数。例如，我们不知道大脑中每种细胞的数量，甚至连脑细胞的类型都还处于持续争论状态。一个恰当的理论框架，可以集中所有的实验数据和观点，共同用于理解生物的复杂性。1950s，人们开发了信息理论，用于研究如何用有效的方式发送信息，减少错误。这个理论也与大脑神经元的相互交流有关。Sharpee利用信息学理论识别支配生物复杂性的基本定律，用它来预测系统内总共有多少种细胞，以及这些细胞应该如何协作。2015年，研究人员们将他们的这...

细胞株计数的难题与解决方案

细胞株和病毒的放大培养面临挑战。当需要量增加千倍时，细胞培养瓶对于工业规模是不可行的。微载体为生物反应器中贴壁细胞的生长提供了方便，微载体充当贴壁细胞可附着的支架，允许它们增殖，而生物反应器使细胞-微载体复合体自由悬浮在培养基中。因此，贴壁细胞也可以像悬浮细胞那样生长，从而简化了放大培养，并允许利用现有的资源用于过程优化和。传统方法的微载体的细胞计数耗时耗力，且计数结果不准确，需要离心样品、PBS重悬、胰蛋白酶消化细胞和台盼蓝或者结晶紫染色等多个步骤来计数在微载体上生长的细胞...

原代细胞实验室检测方法

原代细胞实验室检测（一）包涵体的检测。1.血片及白细胞涂片制备采集的抗凝血标本尽快用血球层推血片，待干燥后冷丙酮固定10min；或提取抗凝血中的白细胞并进行涂片，待干燥后冷丙酮固定10min。2.染色通常采用瑞氏（Wright）染色法、姬氏（Giemsa）染色法及瑞－姬混合染色法。有条件的实验室，可使用美国CDC推荐的染色方法。3.染液配置方法（1）瑞－姬染液：取瑞氏染料和姬氏染料各0.5g，以甲醇研溶，加甲醇500ml保存，每天摇匀１次，１周后可使用。（2）改良McDona...