ATCC细胞株解冻和培养操作推荐

冻存的ATCC细胞株和杂交腐细胞株在运送过程中使用干冰保持低温。收到细胞后，可以立即解冻复苏，去除二甲基亚砜（DSMO0）后进行细胞培养。如果不立即复苏培养细胞，必须将细胞冻存管放置于液氮罐气相层储存。请不要将细胞存储在-130℃以上的温度。如果温度不够低，达不到-130℃，细胞活力会立即下降。ATCC细胞株产品附带一份产品资料单，其中包含细胞株的信息和详细的操作指南。细胞株的所有详细介绍可以在ATCC找到，产品资料单也可以在ATCC下载。此外产品还附带细胞株具体批次的检测报...

原代细胞保存的主要方法之一细胞冻存

利用冻存技术将原代细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5％．15％的甘油或二甲基亚砜(DMSO)，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细...

原代细胞培养基的保存方法分析

原代细胞培养基的保存方法分析1.干粉，买了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我认为没有必要。但4度是非常必要的。保证期是有提示的。2.配好的无血清培养基一定保存在4度，保存不要超过3个月。用时根据提示要加入谷胺酰胺。3.加入血清的培养基，保存在4度不要超过1个月，从时间太长，活性下降。当然稍微长点也不一定出问题。但是根据细胞而定;如果原代培养，新鲜，如果是原代细胞，或仅维持传代就不太要紧。但是原则是越新越好。786-O[786-0],人肾透明腺癌细胞HumanHEC-1A...

原代细胞如何消除组织培养的污染

原代细胞当重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。①在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规原代细胞传代的浓度。...

哪些方法可以使细胞适应无血清培养基

1．细胞株直接适应法式—将细胞直接从添加血清的培养基转换到无血清培养基中。2．连续适应或循序隔绝法—分几步将细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基中。与直接适应法相比较，连续适应法对于细胞更温和些。为了使细胞适应无血清培养基，关键是细胞培养应满足以下条件：1．处于对数生长中期2．存活率大于90%3．在适应期间，以较高的初始细胞株接种量进行接种下面列出了常规适应步骤。初始细胞接种量、细胞产量和培养周期是连续优化的良好开端。直接适应有些类型的细胞可以直接从含有血清培养基适应无血...

干细胞过滤器的产品优势

干细胞过滤器是一种用于细胞过滤和分离的微流体器件。本产品由一个封闭的流体通道作为细胞过滤器腔体，1、在细胞过滤器腔体的两端设有流体的输入端口；2、和流体输出端口；3、在流体的输入端口和流体输出端口之间设置细胞过滤装置即细胞颗粒阻挡器；4、在细胞颗粒阻挡器旁为流体池；5、细胞阻挡结构可阻挡流体中较大的细胞，并使之聚集在流体池中，并被流体池中的相关抗体所捕获。通过外加的物理或化学作用，使其破碎或灭活，达到细胞过滤的作用。干细胞产品说明：尼龙网格大小为40微米、70微米以及100微...

不同细胞培养基的除菌方式及注意事项

细胞系培养基灭菌的方式分为高压灭菌和膜过滤除菌，不同的培养基由于其营养成份不同，灭菌方式也可能不同。绝大多数细胞培养基不适宜高压灭菌。因为高压灭菌易破坏细胞培养基中的一些成份，如某些维生素等，因此，在通常的高压灭菌型细胞培养基中，配方中的维生素种类与过滤型培养基相比较少，对于细胞系生长*的谷氨酰胺等，需待高压后补充到培养基中。在高压过程中，灭菌用器皿的选择应注意避免蒸发或是污染。在大规模工业化中，可以采用短时超高温处理的方法进行流水线式的灭菌，能够提高自动化效率，降低成本。膜...

人外周T细胞的分离与鉴定

材料：淋巴细胞株悬液、1%SRBC悬液、灭活之小牛血清、离心管、试管、吸管、载玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。方法（1）取上述配好之淋巴细胞悬液0.1ml于洁净小试管中，加入1%SRBC悬液0.1ml。再加入小牛血清0.1ml，混匀，置37℃水浴箱中5分钟，500转/分，离心5分钟，放4℃冰箱2-24小时。（2）从冰箱中取出试管，留适量上清液，轻轻摇匀，加0.8%戊二醛2滴，轻摇后，置4℃冰箱15分钟，取出，作成涂片，待自然干燥，以瑞氏染液染色。（3）计数：镜下观察，凡结合三...