原代细胞核心成分

原代细胞核接头蛋白LDB1是多蛋白转录复合体中的一个核心成分。Li等研究发现,在小鼠胚胎和成体造血干细胞中LDB1起到关键作用。在造血干细胞和前体细胞中敲除该基因会造成一些维持多能性相关基因的转录下调,ChIP-Seq结果显示,LDB1形成的复合体结合在这些基因的启动子区域,暗示LDB1维持造血干细胞中起核心作用。多能造血前体细胞是一种干细胞样细胞,表达各种基因,且有分化成包括免疫系统细胞在内的大量不同类型血细胞的能力。Zhang等利用ChIPSeq和RNA-seq技术在小鼠...

肿瘤细胞转染要素

肿瘤细胞使用瞬时转染来蛋白瞬时转染表达蛋白以往为了获得蛋白质的高表达产量，必须先转染细胞，然后挑选一个稳定的转染细胞系进行蛋白的扩增和富集。而挑选这样一个细胞系往往需要花费数周甚至数月的时间，这既可能是由于试剂的细胞毒性也可能是由于转染的低效率。如果是因为转染试剂具有细胞毒性，那么只有少数细胞能够存活，从而导致蛋白质的产量很低。而如果是因为转染成功的细胞太少，那么那些未转染的细胞生长速度大大超过转染成功的细胞，其结果同样也只能产生少量的目标蛋白。使用一种温和的可以转染大多数细...

原代细胞的四大特点

1、生命的起源原代细胞人体起源一个单细胞受精卵(*代干细胞)，经历卵裂(干细胞持续扩增，增加细胞数量)、胚层出现(干细胞开始分化出功能细胞)、组织器官形成(功能细胞的有序排列)及胚后发育这样一个连续过程。2、维持人体动态平衡的种子细胞人体通过干细胞增殖和分化来实现细胞更新。成年并不意味着细胞增殖和细胞分化的结束，而仍然存在着受调控的组织更新过程。在一些组织中，如骨髓、表皮等，新细胞可不断地产生，以补充因分化而衰老、死亡的细胞。干细胞的增殖保持着机体内细胞的动态平衡。3、干细胞...

勿怕原代细胞消化过度

对于初学者而言，养原代细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细...

细胞株是否会受到免疫排斥

研究人员发现相对于细胞株形成的畸胎瘤，由iPS形成的畸胎瘤中的某些基因呈高水平表达。其中的Zg16及Hormad1两个基因的异常表达可直接导致遭受特异的免疫攻击。研究人员表示这些基因在正常情况下处于关闭状态直至胚胎开始对自身组织形成免疫耐受为止，如此就能确保它们不会被宿主所识别。而iPS的重编程程序有可能改变了这些基因的正常表达。长久以来，科学家们在开展iPS研究的过程中把iPS衍生获得的终末分化细胞例如神经细胞或心肌细胞移植到小鼠体内，证实它们不会引起免疫排斥（但事实上其中...

何促进原代细胞生长并抑制分化？

原代细胞为了保持hESC存活且具有多能性，研究人员通常在滋养层细胞（也就是一层小鼠胚胎成纤维细胞）上培养，或者在微载体上成簇培养。但是在这些基质上培养干细胞是相当昂贵的，而且培养物不能在很长时间内保持未分化状态，尽管所有必需的生长因子都存在。这种培养基能够在无滋养层的条件下长时间维持神经细胞的生长和正常表型。在研究过程中，研究人员注意到并非所有细胞都分化了。他们怀疑是培养基的选择导致了这种现象，于是他们开始集中精力研究培养基如何促进干细胞生长并抑制分化。使用这种新的培养基，研...

细胞系的物理性质

（１）细胞系的密度单位体积中粉尘的质量称为粉尘的密度，单位为ｋｇ／ｍ３或ｇ／ｃｍ３。由于粉尘产生的情况不同，测试条件不同，获得的密度值亦不同。所以一般将粉尘的密度分为真密度和堆积密度等不同的概念。以真实体积所得的密度称为粉尘的真密度，常用符号ρｐ表示。粉尘在自然堆积状态下，颗粒之间和颗粒内部都存在空隙。以堆积体积求得的密度称为粉尘的堆积密度，常用符号ρｂ表示。对于一定种类的粉尘，其真密度为一定值，而其堆积密度则随空隙率（是指粉尘粒子间的空隙体积与堆积粉尘的总体积之比值，常用符...

肿瘤细胞调控元件的分析

肿瘤细胞转染方法不同，对转染结果影响很大。常见的转染方法有：1.磷酸钙法：该方法利用磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞原理得到瞬时或稳定转染结果，操作简便但重复性差，不可用于原代细胞的转染。2.DEAE-右旋糖苷法：带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞，可用于瞬时转染，方法相对简便、结果可重复但对细胞有一定的毒副作用。3.电穿孔法：利用高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA通过膜上形成的小孔导入。稳定转染，瞬时转染均适用。适用性广但细胞...