细胞株分离培养关键因素

近期根据经验总结了细胞株分离培养的2个关键因素。1、组织的活性：如果我们取的都是坏死的组织或者结缔组织，我相信任何方法都不可能分离出来活的细胞的。另外，取完的组织要冷藏存放，并且越早分离越好，在24h内，zui久不要超过48h。2、组织的消化：在组织消化前，组织剪的越碎越好（1mm3左右为宜），细胞株组织的大小决定了组织的消化时间，不同组织消化时间差别较大：例如肺癌在2h-2.5h；食管癌在1个多小时。四lv对苯二甲suan标准品1000mg/L于甲醇,1ml丁草胺CDGG-...

肿瘤细胞的比率及分选后的回收率

在进行肿瘤细胞分选前，保留一小部分起始样本是非常重要的。这样有助于评估分选前样品中目标细胞的比率及分选后该细胞的回收率。各种组织和细胞来源中的细胞比率可以根据已发表的数据来估算。然而，实际操作中，细胞比率可能因供体而异，并且取决于是否来自正常的、患病的还是转基因的样本。细胞回收率：计算分选后的细胞回收率是评估实验是否成功的宝贵工具。需要准确地得到以下四个数据：分选前起始样本中的细胞总数*目标细胞在起始样本中的比率*分选后的细胞总数分选后目标细胞的纯度使用以下公式计算细胞回收率...

细胞系自然分化转录因子控制

细胞系自然分化生成特定细胞的过程由转录因子控制，这些转录因子直接控制了基因表达。因此该研究团队系统地研究了不同的转录因子组合对干细胞分化为GABA分泌神经元的影响。zui终他们发现了三种关键的转录因子，通过优化的实验方法，他们只需要35天就可以将超过90%的干细胞转化为GABA分泌神经元。就连Sun本人都对这一实验结果感到震惊：“这些诱导出来的细胞就像真正成熟的神经元一样。”他和他的同事在这些细胞中发现了不同亚型的GABA分泌神经元，它们的分子及电生理学特征与自然发育的神经元...

原代细胞转染实验步骤

原代细胞实验需要注意以下几点：1、DNA的量：Lipofectamine2000=1：2~32、细胞密度大约占培养板的80%左右，转染。3、转染期间不要加抗生素，否则会导致细胞死亡。步骤如下：以24孔培养板为例1、转染前一天细胞换新的培养基2、制备DNA-Lipofectamine2000复合物，如下:a、用50ul无血清培养基稀释DNA（0.8g），轻轻混匀；b、Lipofectamine2000使用前，轻轻混匀，用48ul无血清培养基稀释2ulLipofectamine2...

肿瘤细胞的分子结构数据

肿瘤细胞广泛存在于自然界中，几乎所有的油脂中都含有数量不等的软脂酸组分。中国产的乌桕种子的乌桕油中，软脂酸的含量可高达60%以上，棕榈油中含量大约为40%，菜油中的含量则不足2%。分子结构数据1、摩尔折射率：77.732、摩尔体积（m3/mol）：287.33、等张比容（90.2K）：690.54、表面张力（dyne/cm）：33.35、肿瘤细胞极化率（10-24cm3）：30.81200mg130372-200301乙酰吉它霉素效价测定100mg130375-200701制...

肿瘤细胞的应用能力

肿瘤细胞衍生的神经元移植后，小鼠表现出恢复，而细胞仍然成长为它们*成熟的形式，这项研究类似于2013年加州大学旧金山分校发表的一项研究，当时科学家将胎儿小鼠的脑细胞移植到癫痫小鼠中。虽然这些研究结果鼓舞人心，但是Chung指出，还需要一个过程来纯化神经元，所以只有那些已知抑制癫痫发作的神经元（称为中间神经元）才能被移植，在考虑用于人类治疗之前，需要完成进一步的灵长类动物研究。“因为胚胎干细胞能够分化成多种不同的细胞类型，甚至当我们将它们转化为神经元时，总是还会有其他类型的细胞...

肿瘤细胞扩增的瓶颈在哪里

培养人类胚胎肿瘤细胞的研究者们发现，核型正常的细胞在植板（plating）之后只有少数能够分裂，而且它们的子细胞还会出现持续性的死亡，很少能形成可以长期增殖的克隆。Sheffield大学的PeterAndrews教授和DanielCoca教授领导研究团队，对单个人类胚胎干细胞进行了延时成像，并由此鉴定了限制干细胞生长的主要瓶颈。研究显示，在长期培养过程中发生了适应性突变的干细胞，受到的生长限制有所缓解，能够进行更有效的扩增。Sheffield大学的DrIvanaBarbari...

肿瘤细胞损伤修复能力

肿瘤细胞的DNA损伤修复能力是决定其基因组稳定性的重要因素。在所有类型的DNA损伤中，DNA双链断裂是zui为严重的一种。因此细胞进化出了两条修复通路：非同源末端连接（NonhomologousEndJoing,NHEJ）和同源重组（HomologousRecombination，HR）来修复这类DNA损伤。在这项研究中，研究人员利用年轻和年老组小鼠的皮肤细胞诱导成iPS细胞系，发现年老组iPS细胞的基因组稳定性下降，NHEJ修复能力下降，但HR修复能力不变。在对NHEJ通路...