技术文章
TECHNICAL ARTICLES干细胞过滤器是一种用于细胞过滤和分离的微流体器件。本产品由一个封闭的流体通道作为细胞过滤器腔体,1、在细胞过滤器腔体的两端设有流体的输入端口;2、和流体输出端口;3、在流体的输入端口和流体输出端口之间设置细胞过滤装置即细胞颗粒阻挡器;4、在细胞颗粒阻挡器旁为流体池;5、细胞阻挡结构可阻挡流体中较大的细胞,并使之聚集在流体池中,并被流体池中的相关抗体所捕获。通过外加的物理或化学作用,使其破碎或灭活,达到细胞过滤的作用。干细胞产品说明:尼龙网格大小为40微米、70微米以及100微...
细胞系培养基灭菌的方式分为高压灭菌和膜过滤除菌,不同的培养基由于其营养成份不同,灭菌方式也可能不同。绝大多数细胞培养基不适宜高压灭菌。因为高压灭菌易破坏细胞培养基中的一些成份,如某些维生素等,因此,在通常的高压灭菌型细胞培养基中,配方中的维生素种类与过滤型培养基相比较少,对于细胞系生长*的谷氨酰胺等,需待高压后补充到培养基中。在高压过程中,灭菌用器皿的选择应注意避免蒸发或是污染。在大规模工业化中,可以采用短时超高温处理的方法进行流水线式的灭菌,能够提高自动化效率,降低成本。膜...
材料:淋巴细胞株悬液、1%SRBC悬液、灭活之小牛血清、离心管、试管、吸管、载玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。方法(1)取上述配好之淋巴细胞悬液0.1ml于洁净小试管中,加入1%SRBC悬液0.1ml。再加入小牛血清0.1ml,混匀,置37℃水浴箱中5分钟,500转/分,离心5分钟,放4℃冰箱2-24小时。(2)从冰箱中取出试管,留适量上清液,轻轻摇匀,加0.8%戊二醛2滴,轻摇后,置4℃冰箱15分钟,取出,作成涂片,待自然干燥,以瑞氏染液染色。(3)计数:镜下观察,凡结合三...
原代细胞实验器具清洗l玻璃类1、主要有:培养瓶,血清瓶,小青瓶,移液管,离心管,试管,培养皿等。2、清洗步骤:泡在含有洗洁净的自来水中→捞出来用毛刷将实验器具各个面刷洗至少25遍→自来水冲洗25遍→过一遍一蒸水→泡入铬酸,过夜(24h左右)→从铬酸中捞出器具,自来水冲洗25遍→过三遍一蒸水,三遍三蒸水→烘箱内烘干→收入柜子备用→用前高温灭菌(121℃,25min)→烘干→使用。注意:新的玻璃器具先要泡盐酸1天,然后清洗步骤与上面相同。l塑料类1塑料类器具主要包括:孔板,大枪头...
影响哺乳动物原代细胞复苏的因素包括:(a)细胞类型,(b)生长阶段,(c)细胞处于细胞周期的哪个阶段,(d)终悬液中的细胞数量和浓度。可通过优化以上因素来提高复苏细胞活力,另外,还需考虑冻存保护剂的特性以及冻存过程的具体操作。哺乳动物细胞培养对其他细胞和微生物的污染特别敏感,例如Hela细胞。由于这种特性,初始细胞系可通过同工酶分析、染色体组型分析、免疫分析或基因组分析,检测来源。冻存前后均应该进行如上检测。特别需要注意的是,病毒和支原体污染。一套完整健全的哺乳动物细胞系鉴定...
(一)细胞系选材常用胚胎动物或新生鼠神经组织。鸡胚常用胚龄6-8d,新生鼠或胎鼠(12-14d)或人胚胎。不过也有认为与组织相关。如大白鼠胚胎以19d为宜,小鼠以18d为宜,大鼠纹状体以10d为宜;若纹状体与黑质联合培养的大鼠胚,则黑质以13d,纹状体18-21d为宜;小脑以20-21d小鼠胚胎,所获蒲氏细胞成活率高,颗粒细胞正在分化;脊髓与DRG联合培养,常用4-7d鸡胚或12-14d小鼠胚胎,取材易,神经成活率高。(二)取材。脑则取出相应组织,在解剖液中先剪碎,以使胰酶消...
巨核细胞株虽然在骨髓的造血细胞中为数zui少,仅占骨髓有核细胞总数的0.05%,但其产生的血小板却对机体的止血功能极为重要。每个巨核细胞均可产生1000-6000个血小板。生成血小板的巨核细胞也是从骨髓中的造血干细胞分化发展来的。造血干细胞首先分化生成巨核系祖细胞,也称巨核系集落形成单位(colonyformingunit-megakaryocyte,CFU-Meg)。祖细胞阶段的细胞核内的染色体一般是2-3倍体。当祖细胞是2倍体或4倍体时,细胞具有增殖能力,因此这是巨核细胞...
(一)原代细胞操作步骤1.用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中,反复洗涤,尽量除去血污,用滤纸吸去表面的液体。2.将湿重约1g的肝组织放在小平皿中,用量筒量取8ml预冷的0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液,先加少量该溶液于平皿中,尽量剪碎肝组织后,再全部加入。3.剪碎的肝组织倒入匀浆管中,使匀浆器下端浸入盛有冰块的器皿中,左手持之,右手将匀浆捣杆垂直插入管中,上下转动研磨3~5次,...
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