如何来选择原代细胞仪测定的常用荧光染料呢？

1.原代细胞抗原的密度①高表达的抗原可选择几乎所有的荧光素；②低密度表达的抗原需要可提供较高S/N比值的荧光素如PE/APC。2.自发荧光①每种细胞群都有不同水平的自发荧光；②所有的荧光通道均可观察到自发荧光，但自发荧光强度在波长较长时迅速降低；③对自发荧光较强的细胞，选择发射波长较长的荧光素（如APC）可得到较好的S/N比值；④对自发荧光比较弱的细胞，发射波长较长的荧光素对S/N提高没有明显的改善。可选用FITC。3.非特异结合①许多荧光抗体可产生低水平的非特异结合，使阴性...

如何确保肿瘤细胞实验成功？

1.肿瘤细胞目标长度为18–30个核苷酸。2.尝试将熔解温度限制在55至65˚C，温度相差小于5˚C。3.如果引物的Tm值较低，则寻找G和C含量更高的序列，或者稍微延长引物的长度。4.GC的目标含量为40-60%，3’端的C或G可促进结合。5.一般在引物的5’限制性位点处添加3-4个核苷酸，以实现切割。6.避免二级结构区，富含GC和富含AT的结构域应分布均衡。7.避开连续四个或更多的同一碱基重复或二核苷酸重复。8.避免引物之间的互补（引物内有超过三个碱基互补）或引物内部形成互...

肿瘤细胞抗氧化能力的修复

肿瘤细胞衰老是一种不可避免的自然现象,它会造成生物体机能的衰退、抵抗力的减弱和结构的退行性变化。20世纪60年代,Harman提出的衰老的自由基学说已被人们广泛接受。自由基是生物体代谢的自然产物,种类繁多,具有强大的氧化性和高度的活泼性,能够使蛋白质、核酸等大分子交联,影响机体正常功能。血液作为机体循环系统的重要组分,不仅能运输各种代谢物,而且在维持机体内环境酸碱平衡、渗透压平衡、清除体内自由基等方面起着至关重要的作用。生物体内与细胞氧化损伤和衰老等代谢活动相关的自由基绝大多...

细胞系的利用效率如何提高？

【目的】细胞系为提高L-苹果酸产量及木糖利用率，以寄生曲霉(AspergillusparasiticusCICC40365)为菌种，木糖为碳源，对其发酵工艺及木糖代谢途径进行初步研究。【方法】采用单因素试验和响应曲面法(Box-Behnken设计)对培养基和发酵条件进行优化。【结果】获得*培养基配方为：木糖100.0g/L、硫酸铵2.0g/L、酵母浸粉3.0g/L、硫酸镁0.20g/L、硫酸锰0.15g/L、硫酸亚铁0.08g/L、碳酸钙80.00g/L，L-苹果酸的产量为5...

原代细胞复核鉴定

1、原代细胞的复核鉴定古菌菌种的复核鉴定应根据不同类群的主要特征，选择zui能反映该类群有别于其他分类群的特征来进行。包括：细胞形态、营养类型、氧的需求、以及对温度、酸、碱、盐的需求和耐受性等理化特性试验、细胞膜脂成分分析等。序列测定为复核的非*要素。当需要复核的菌种缺少序列测定数据时，应将16SrDNA序列测定作为复核鉴定的内容之一。2、细菌的复核鉴定针对具体类群，从以下几个方面选择有代表性、鉴别性的特征特性进行复核鉴定。a、显微形态观察：如细胞形状、鞭毛、芽孢以及放线菌的...

肿瘤细胞溶液配制的注意事项

（1）肿瘤细胞分析实验所用的溶液应用GB6682中规定的三级水配制，容器应用纯化水洗涤三次。特殊要求的溶液应事先作空白值检验。（2）溶液要用带塞的试剂瓶盛装，见光易分解的溶液要装于棕色瓶中，挥发性试剂瓶塞要严密，见空气易变质及放出腐蚀性气体的溶液也要盖紧，必要时用蜡封住。浓碱液应用塑料瓶盛装。（3）每瓶试剂必须有标明名称、规格、浓度和配制日期的标签。（4）配制硫酸、磷酸、硝酸、盐酸等溶液，都必须将酸倒入水中。配制时不可在试剂瓶中进行配制。（5）用有机溶剂配制溶液时，有时有机物...

肿瘤细胞缺乏多能性

“我们的研究结果表明，肿瘤细胞和它们缺乏多能性的子代细胞，还有血祖细胞（bloodprogenitors）在天然生长环境中的行为与它们在体外或移植后的行为具有一些差异，”文章一作哈佛干细胞研究所的AlejoRodriguezFraticelli博士说。自然条件下，不受干扰的造血作用：成熟的血细胞和免疫细胞过程此前，由于缺乏适当的工具研究血液的自然形成，大多数有关个体血细胞起源的研究都是在移植后进行的。研究人员认为，移植后的细胞会“受到干扰”，甚至消失。NHLBI干细胞和细胞疗...

原代细胞贮存营养物质的作用

原代细胞起暂时贮存营养物质的作用，包括多糖、脂类、多磷酸盐等。细菌核区DNA以外的，可进行自主复制的遗传因子，称为质粒（plasmid）。质粒是裸露的环状双链DNA分子，所含遗传信息量为2~200个基因，能进行自我复制，有时能整合到核DNA中去。质粒DNA在遗传工程研究中很重要，常用作基因重组与基因转移的载体。细菌和其它原核生物一样，只有拟核，没有核膜，DNA集中在细胞质中的低电子密度区，称核区或核质体（nuclearbody）。细菌一般具有1-4个核质体，多的可达20余个。...