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NEWS INFORMATION现有的肿瘤细胞一系列治疗方法都以造孔毒素的分子结构为目标,使其失去杀死细胞的能力。但是这些疗法必须根据不同的疾病和病情进行定制,这些有害蛋白家族已知有80多个,每一个均有不同的结构。使用新的纳米海绵疗法可中和每一种蛋白,而不用管其分子结构。张良方团队将真实的红细胞膜包裹在生物相容性的聚合物纳米粒子周围。单个血红细胞可提供足够的膜材料,出超过3000个纳米海绵,每个直径大约为85纳米。因为血红细胞是造孔毒素的主要目标,纳米海绵一旦进入血液将担任诱饵角色,吸收破坏性蛋白并中和其毒...
保持肿瘤细胞的活性状态是每一个细胞研究者都在仔细做的事情,因为细胞的活力和状态是不断变化的,而非一成不变的。在细胞体外培养的过程中,离开机体保护的细胞是很脆弱的,在陌生的生长环境下即便是培养条件的轻微改变,也可能对细胞产生无法预估的影响。在原代细胞培养过程中,即使保持培养条件*一致,在传代过程中,细胞的存活质量也是逐渐下降的。以人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)为例,HUVEC细胞是研究内皮细胞功能的经典体外细胞模型。在心血管疾病的研究中,主要用于研究内皮细胞功能改变或损伤后...
选择哪种细胞系转染方法通常需要综合多方面的考虑因素,比如靶向的细胞类型,传递的分子种类,以及转染效率哪家强等等诸如此类的问题。我们认为,“zui吸引人的方法就是zui简单的方法,即化学转染方法”。大体来说,传统的化学和物理转染方法就能满足大部分研究人员的需要,因为一般的科研采用的都是易于转染和培养的细胞系。但是这些方法常常是有毒的,而且当面对原代细胞、干细胞或其他难转染的细胞类型的时候,化学方法的转染效率就较低了。相对来说病毒载体方法对范围较广的细胞类型,转染效率就相当高了,...
重组原代细胞因子要求:1.真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE,RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。2.纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。3.生物活性:进行相应的体外(invitro)或体内(invivo)活性检测。4.蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。5.内毒素:kineticLAL法检测内毒素。6.微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。重组...
Tag-lite是SNAP-Tag与HTRF技术相结合,用来进行活肿瘤细胞表面受体分析的一种技术。SNAP和CLIP是小的融合标签蛋白,可特异地与底物通过苄甲基不可逆共价结合,其底物分别为苄甲基鸟嘌呤(BG)和苄甲基胞嘧啶(BC)。由于底物可与各种染料形成衍生物,这样,通过共价反应,染料就标记到SANP或CLIP上了。SNAP或CLIP可以非常容易地融合到蛋白质的N端或C端,所以我们可以构建SNAP或CLIP与目标蛋白的表达载体。质粒转染、融合蛋白表达后,加入标记了荧光染料的...
研究人员介绍,人类胚胎细胞株可分化成人体内的各种细胞及组织,所以对治疗人类重大疾病有巨大潜力。但目前干细胞疗法发展面临的一个主要瓶颈就是移植后的免疫排斥。新研究的成功关键在于开发出一种“人源化”实验鼠。徐洋表示,虽然小鼠和人的免疫系统有很多相似处,但它们也有很多不同的地方,所以小鼠模型中获得的关于防止免疫排斥的策略在人的临床试验中大多以失败告终。为解决这个问题,他们将人胚胸腺及胚肝中的造血干细胞移植到免疫缺陷小鼠体内,培育出“人源化”实验鼠,它们会有效排斥异体人类胚胎干细胞分...
原代细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标,如药物处理、放射性或紫外线照射、培养条件变化等。目前常用的方法有很多,如有台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、H放射性同位素掺入法、MTT法等。本文总结了一些常用的细胞活性检测方法的原理、特点,并对比了各自的优缺点。一、染色计数法1.化学染色法染色计数法是细胞培养中检查细胞死活zui常用的方法,直接利用死细胞和活细胞对染料的不同亲和力,检查细胞活性,能在光学显微镜下观察到染色结果。可分为两类:死细胞着色法和活细...
(1)选择处于对数生长期的原代细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的*培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培...
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