杂交瘤细胞技术分析

杂交瘤细胞技术分析克隆化的细胞可以在体外进行大量培养，收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限，其不能超过特定的细胞浓度，且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。杂交瘤细胞具有从亲代淋巴细胞得来的肿瘤细胞的遗传特性。如接种到组织相容性的同系小鼠或不能排斥杂交瘤的小鼠（无胸腺的裸鼠），杂交瘤细胞就开始无限地繁殖，直至宿主死亡。产生肿瘤细胞的小鼠腹水和血清中含有大量的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体，这种抗体的效价往往高于培养细胞上清液...

体外培养的细胞系差异和分化

体外培养的细胞系差异和分化1、差异：细胞系离体后，失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响，生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中，日久天长，易发生如下变化：分化现象减弱；形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡；或发生转化获得不死性，变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此，培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体，它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能，也有一些不同于体内细胞的性状。实际上从细胞一旦被置于体外培养后，这种差异就开始发生了。虽然体外细胞与机体细胞存...

选购细胞株需要考虑哪几个因素

选购细胞株需要考虑哪几个因素1、细胞株的生物等级，由于有些细胞株及菌株属于管制品，所以从国外购货比较麻烦。2、报关时尽量提供比较充足的证明材料，以免担搁时间而导致干冰挥发完细胞株死亡，甚至于被退回给发货人。选购细胞株注意事项3、在购买国外细胞株时，需交待国外加比较多的干冰一般在13公斤以上，采用比较密封的泡沫盒加套纸箱。4、如果通过国外细胞株在国内的代理商购买的话，合同中需注明以下一些内容：1）.明确的到货时间，这个时间需注明的是工作日，还是普通日。2）.在接到细胞株后，要求...

原代细胞生物学从哪几个方面学习

原代细胞生物学从哪几个方面学习*、认识原代细胞生物学课程的重要性，正如原子是物理性质的zui小单位，分子是化学性质的zui小单位，细胞是生命的基本单位。50年代以来诺贝尔生理与医学奖大都授予了从事细胞生物学研究的科学家，可见细胞生物学的重要性。如果你将来打算从事生物学相关的工作，学好细胞生物学能加深你对生命的理解。第二、明确细胞生物学的研究内容，即：结构、功能、生活史。生物的结构与功能是相适应的，每一种结构都有特定的功能，每一种功能的实现都需要特定的物质基础。如肌肉可以收缩、...

原代细胞HEPES缓冲液的使用方法及配制

原代细胞HEPES缓冲液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH调pH至7.2，滤过除菌后使用。原代细胞此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L)，使用前取99ml培养液加入lml贮存液，zui终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中，用...

培养细胞无菌操作注意事项

培养原代细胞无菌操作注意事项1、操作原代细胞进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方，瓶口zui易污染，加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸...

细胞系活性检测方法之乳酸脱氢酶（LDH）释放法

细胞系活性检测方法之乳酸脱氢酶（LDH）释放法LDH是活细胞浆内酶，当细胞损伤，细胞膜通透性变化时，会将LDH释放到培养液中。因此培养液中该酶的活性与被裂解的细胞系数量成正比。由LDH催化的酶促反应在催化乳酸生成丙酮酸的过程中使氧化型辅酶I（NAD）变成还原型辅酶I（NADH+H），后者再通过递氢体一吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原碘硝基氯化四氯唑（INT），INT接受氢离子被还原成紫红色的化合物，酶标仪检测其OD值。与结晶紫染色法和MTT比色法进行灵敏度、重复性和相关性比较，...

原代细胞取材的基本要求和注意事项

原代细胞取材的基本要求和注意事项人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，是进行细胞培养的*步，若取材不当，将会直接影响细胞的体外培养，现将取材的基本要求和注意事项叙述如下：一、取材的基本要求（1）取材要注意新鲜和保鲜新鲜组织易于培养成功，取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞，尽快入箱培养，若不能即时培养，应将组织浸泡于培养液内，于4℃存放。若组织块较大，应在清除表面血、坏死组织、脂肪和结缔组织后，切碎于培养液内4℃存放，但时间不能超过24h。对于已切碎的组织或血液、淋...